近日，Poseida Therapeutics宣布其与罗氏（Roche）共同开发的在研同种异体CAR-T疗法P-BCMA-ALLO1临床1期试验的早期疗效和安全性积极结果，该疗法用于治疗复发/难治性多发性骨髓瘤（RRMM）患者。

     这些数据来自33名经过至少4周随访的重度预处理患者，中位既往治疗线数为7线。其中，11人接受500mg/m2或1000mg/m2环磷酰胺预处理方案，并注射200万个研究治疗细胞。其余患者在P-BCMA-ALLO1治疗前给予300 mg/m2环磷酰胺治疗。分析显示，在接受充分淋巴细胞耗竭的强化预治疗患者中，接受CAR-T疗法P-BCMA-ALLO1治疗患者的客观缓解率（ORR）为82%（n=9/11），并具有深度临床缓解。用环磷酰胺预处理的治疗患者，CAR-T细胞的扩增和持续性更佳。而在既往未接受过BCMA靶向双特异性T细胞衔接抗体治疗患者的ORR则为100%。

      Poseida还对两名显示高水平CAR-T细胞扩增的患者进行了细胞动力学分析。这些研究表明，这些细胞在一名患者的外周血中保持可测量状态、持续存至少四周；在另一名患者的骨髓中持续存在并保持可测量状态至少六周。此外，在给药后，这两名患者的输注药物发生增殖分化，并产生了更富含效应T细胞的群体，包括杀伤T细胞亚群。

      该疗法展现良好的安全性和可靠性特征，所有意向治疗（ITT）患者均未观察到移植物抗宿主病（GvHD）或剂量限制性毒性，且观察到的细胞因子释放综合征（CRS）和神经毒性发生率较低（均≤2级）。

      Poseida细胞疗法总裁Kristin Yarema在一份声明中说，这些发现是“第一个已知的公开数据集，为TSCM细胞是异体CAR-T的理想细胞类型这一假设提供了明确的临床证据”。

      Poseida的在研产品旨在解决其他CAR-T疗法的局限性，包括反应持续时间、治疗实体肿瘤的能力和安全性问题。据Poseida公司的官网资料，该公司的CAR-T细胞不同于一般的CAR-T细胞，不含有scFv结构，而是由全人源的Centyrin结构域组成，基于其专有的piggyBac非病毒基因递送系统进行工程改造，产生高比例的干细胞记忆T细胞（Tscm）。Tscm细胞是唯一具有自我更新的长寿命T细胞，能够分化成整个T细胞亚群，从而引发针对癌症的效应反应，可能使候选药物更有效、毒性更小、更耐用。数据显示，CAR-T治疗后，TSCM细胞可以存活数年，可能提供持久的抗肿瘤保护。

▲ Tscm细胞（图片来源：Poseida官网）

      从目前的技术来看，生产CAR-T疗法的主要方法基于病毒，而病毒能运送的遗传物质有限，且有安全性上的潜在风险。而piggyBac DNA系统不使用病毒，就能将CAR分子运送到T细胞内，且运送的遗传物质要更多。这有望带来成本更低、生产时间更短的CAR-T疗法，解决当下的瓶颈。

非病毒piggyBac DNA修饰系统能够产生更好的CAR-T疗法，还包括以下特点：

➤装载量大：piggyBac的装载量可能是慢病毒载体的20倍，这可以有效传递大基因，包括多种CAR或TCR分子的可能性；

➤降低风险：与病毒载体系统相比，非病毒载体系统降低了诱变和肿瘤发生的风险；

➤稳定高效：该技术提供高基因插入效率和稳定的转基因表达；

➤生产优势：可以更短时间内生产，制造成本低于病毒方法。

2023年10月17日，TriArm Therapeutics（星尘生物）宣布其非病毒快速制备的FIT-CD19 CAR-T免疫疗法治疗非霍奇金淋巴瘤已获得美国食品和药物管理局（FDA）对IND申请的批准，正式迈入临床实验阶段。FIT-CD19 CAR-T的制备速度之快和制备成本之低，使得这一治疗方案更有可能普及到更多的医疗需求领域。

     Precigen在ASCO 2023上公布了基于非病毒载体的多基因CAR-T疗法PRGN-3005在针对晚期铂耐药卵巢癌患者的1/1b期临床研究数据，展现了其安全性和有效性。PRGN-3005 UltraCAR-T利用Precigen先进的睡美人转座系统共表达抗原特异性CAR，特异性靶向肿瘤细胞、膜结合白细胞介素-15（mbIL15）增强体内扩增和持久性，配合终止开关能精准地消除CAR-T细胞。先进的非病毒多基因递送系统和过夜分散的制造工艺，不需要离体活化和扩增T细胞，在基因转移后仅一天内就能将自体CAR-T细胞输回患者，减少了自体CAR-T治疗的等候时间，可能解决当前T细胞疗法的主要局限性。同时通过结合内在检查点阻断的新机制来解决抑制性肿瘤微环境，省去复杂和昂贵的基因编辑技术，有望降低CAR-T的治疗价格，真正让CAR-T疗法“飞入寻常百姓家”。

      2022年9月17 日，上海邦耀生物“靶向 CD19 非病毒 PD1 定点整合 CAR-T 细胞注射液”临床试验申请，已经获得CDE受理。BRL-201运用了邦耀生物研发的非病毒定点整合CAR-T技术，可以在不使用病毒载体的情况下，将CAR序列定点插入到T细胞基因组的特定位点，一步实现CAR稳定整合和内源基因调控，具有生产成本低、制备时间短、产品均一性高等优点，避免随机插入导致的致瘤风险。值得一提的是，这是世界首个靶向CD19非病毒PD1定点整合的CAR-T产品。

      2022年8月31日，BRL-201的IIT数据发表在顶级期刊Nature上，结果显示：完全缓解率（CR）达到87.5%，客观缓解率（ORR）为100%；无癌生存期最长超过2年，且目前仍处于疾病完全缓解的状态。安全性方面，在所有8例患者中，未观察到CAR-T相关的神经毒性和2级以上细胞因子风暴。